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CRISPR interference或CRISPR-on是利用去核酸酶活性Cas9 (dCas9)与转录效应子(transcription effector)融合蛋白和多个特异引导RNA(gRNA)--dCas9融合系统,阻碍或激活靶基因转录的技术(图)。刘东课题组于3月27日在线(Cell Research)发表题为“Regulation of transcriptionally active genes via the catalytically inactive Cas9 in C. elegans and D. rerio”研究论文,首次将dCas9融合系统用于多细胞生物(斑马鱼和线虫),实现对靶基因表达的原位调控。
该融合系统可有效修饰斑马鱼内耳发育和线虫抗逆反应相关基因表达。该方法不仅适用于蛋白编码基因表达调节,理论上也可用于非编码RNA表达、特殊DNA位点修饰的调控等,且其脱靶负效应低于传统方法。
dCas9融合系统图
红色:CRISPR-on 橘色:CRISPRi 靶基因:蛋白编码基因。
课题组博士生隆例江(PTN)、郭红和姚頔为该文的共同第一作者。刘东研究员和刘朋朋博士为通讯作者。本研究得到国家自然科学基金委,科技部973项目,国家生物膜及膜生物工程重点实验室,教育部细胞与增殖重点实验室,北大清华生命科学联合中心等单位的资助。
文章链接:
http://www.nature.com/cr/journal/vaop/ncurrent/full/cr201535a.html